REVISTA
BRASILEIRA
DE
ANESTESIOLOGIA
PublicaçãoOficialdaSociedadeBrasileiradeAnestesiologiawww.sba.com.br
ARTIGO
CIENTÍFICO
Comparac
¸ões
dos
efeitos
de
sevoflurano
e
propofol
sobre
isquemia-reperfusão
aguda
e
danos
ao
DNA
em
coelhos
Sema
Oncul
∗,
Lale
Karabiyik,
Erdem
Coskun,
Ela
Kadioglu
e
Ozlem
Gulbahar
GaziUniversityFacultyofMedicine,DepartmentofAnesthesiologyandIntensiveCare,Ancara,Turquia
Recebidoem29demaiode2015;aceitoem17deagostode2015 DisponívelnaInternetem10denovembrode2016
PALAVRAS-CHAVE
Genotoxicidade; Estresseoxidativo; Propofol;
Sevoflurano; Lesãodeisquemia reperfusão
Resumo
Justificativaeobjetivos: Compararosefeitosdaanestesiacomsevofluranoepropofolsobre
o danooxidativo ao DNA queocorrenaisquemiadeextremidade inferioreécausada pela
aplicac¸ãodetorniquete.
Métodos: Foramalocadosaleatoriamenteemdoisgruposiguais14coelhosdarac¸aNova
Zelân-dia.GrupoS(n=7)recebeuinalac¸ãodesevoflurano(2,5-4%)eGrupoP(n=7)recebeuperfusão
depropofol(1-2mg·kg−1·min−1),logoapósumtorniquetepneumáticofoicolocadona
extre-midadeinferiordireita.Amostrasdesangueforamcoletadasantesdacolocac¸ãodotorniquete
(fasebasal),após120minutosdeisquemia,15minutosapósaisquemiae120minutosapósa
isquemia.Osníveisdemalondialdeído(MDA)foramanalisadosparadeterminaraperoxidac¸ão
delipídioseeletroforeseemgeldecélulaúnica(EGCU)foiusadaparadeterminarodanoao
DNA.
Resultados: Aos 15minutosapós aisquemia, os níveis de MDA noGrupo P (8,15±2,61M)
foramsuperiores aosdafase basal(6,26±3,19M,p=0,026)edpGrupo S(4,98±0,77M,
p=0,01).OdanocausadoaoDNAfoisemelhantenosdoisgrupos,emboratenhasidomaiordo
quenafasebasal(momentodacauda0,63±0,27,intensidadedacauda3,76±1,26)noGrupo
Pno15minutosdereperfusão(momentodacauda1,05±0,45,p=0,06;intensidadedacauda
5,33±1,56,p=0,01).Oaumentonomomentodacaudaeaintensidadedacaudavoltaramaos
níveisnormaisnosdoisgruposduashorasapósotérminodaisquemia.
Conclusão:Comooestresseoxidativoeoefeitogenotóxicodesaparecemnosestágiosfinaisda
reperfusão,concluímosquenãohásuperioridadetantodesevofluranoquantodepropofolem
práticasdeanestesiaparaprocedimentoscirúrgicosdeextremidadesqueenvolvemousode
torniquete.
©2016PublicadoporElsevierEditoraLtda.emnomedeSociedadeBrasileiradeAnestesiologia.
Este ´eum artigo Open Access sob umalicenc¸aCC BY-NC-ND(http://creativecommons.org/
licenses/by-nc-nd/4.0/).
∗Autorparacorrespondência.
E-mail:[email protected](S.Oncul). http://dx.doi.org/10.1016/j.bjan.2016.10.001
36 S.Onculetal.
KEYWORDS
Genotoxicity; Oxidativestress; Propofol; Sevoflurane; Ischemiareperfusion injury
Comparisonsoftheeffectsofthesevofluraneandpropofolonacuteischemia reperfusionandDNAdamagesinrabbits
Abstract
Backgroundandobjectives: Theaimofthisstudy wastocomparetheeffectsofsevoflurane
andpropofolanesthesiaonoxidativeDNAdamagethatoccursinlow-extremityischemiaandis
causedbytourniquetapplication.
Methods:FourteenNewZealandrabbitswererandomlyallocatedintotwoequalgroups.Group
S(n=7)receivedsevoflurane(2.5---4percent)inhalationandGroupP(n=7)receivedapropofol
infusion(1---2mg·kg−1·min−1),afterwhichapneumatictourniquetwasplacedontherightlower
extremity.Bloodsampleswerecollectedpriortotourniquetplacement(baseline),120minafter
ischemia,15minafterischemiaand120minutes(min)afterischemia.Malondialdehyde(MDA)
levelswereanalyzedtodeterminelipidperoxidation,andsinglecellgelelectrophoresis(SCGE)
wasusedtodetermineDNAdamage.
Results:At15minafterischemia,theMDAlevelsinGroupP(8.15±2.61M)werehigherthan
baseline(6.26±3.19M,p=0.026)andGroup S(4.98±0.77M,p=0.01).DNAdamage was
similarinbothgroups,althoughDNAdamagewashigherthanbaseline(tailmoment0.63±0.27,
tailintensity3.76±1.26)inGroupPatthe15thminuteofreperfusion(tailmoment1.05±0.45,
p=0.06; tail intensity5.33±1.56, p=0.01). The increase intail momentand tailintensity
returnedtonormallevelsinbothgroups2hoursaftertheterminationofischemia.
Conclusion:Given thatoxidative stressandgenotoxic effectdisappear inthelate stagesof
reperfusion,weconcludethatneithersevofluranenorpropofolcanbeconsideredsuperiorto
theotherinanesthesiapracticesforextremitysurgeriesinvolvingtheuseofatourniquet.
©2016PublishedbyElsevierEditoraLtda.onbehalfofSociedadeBrasileiradeAnestesiologia.
Thisisanopenaccess articleundertheCCBY-NC-NDlicense(http://creativecommons.org/
licenses/by-nc-nd/4.0/).
Introduc
¸ão
O uso de torniquetes proximais é frequente em cirurgias demembrosparaproporcionarumcampooperacionalsem sangramento.Quandoooxigênioéreintroduzidonotecido isquêmico apósa desinsuflac¸ão dotorniquete, apresenc¸a macic¸aderadicaislivresdeoxigênioprovocaaperoxidac¸ão lipídicadamembrana.Esseprocessodesencadeiaaoxidac¸ão dosácidosgraxospoli-insaturados,destróiasestruturasda membrana e produz metabolitos tóxicos, como o malon-dialdeído (MDA).1,2 Esse processo desempenha um papel significativonapatogênesedalesãodereperfusão.OMDA éumaldeídodebaixopesomoleculareumproduto inter-médiodaperoxidac¸ãolipídicaquetemsidofrequentemente usadocomoummarcadordaformac¸ãoderadicaislivres.
Aformac¸ãoderadicaisdeoxigênioinduzidapelalesão deisquemia/reperfusão(I/R)causadanooxidativonoDNA
e desempenha um papel significativo na patogênese da lesão de reperfusão.3,4 A quantidade de informac¸ão exis-tentesobreodanooxidativocausadoaoDNAemlesõesde reperfusãoinduzidapor torniqueteé limitada, embora as drogasanestésicaseoestresserelacionadoàcirurgiasejam conhecidosporcausardanoscelulares.5
Sevofluranoepropofolsãoagentesvoláteise intraveno-soscomumenteusadosemanestesia.Algunsestudosclínicos e experimentais sem I/R mostraram que sevoflurano
pro-vocadanosreversíveisnoDNA,5,6emboraestudosdiferentes invivoein vitrotenhammostradoquepropofoldiminuio danocausadoaoDNAounãocausadanoaoDNA.7---9
Ensaiosgenotóxicos sãocomumente usadospara moni-torardanosnoDNA.Otestedocometa(ousinglecellgel
electrophoresisassay---SCGE)temsidoamplamenteusado emestudosinvitroeinvivoporserummétodosensívele simplesparamedirasquebrasdecadeiasimplesedecadeia dupla,sítioslábeisalcalinos,lesõesoxidativasereparosdo
DNA.10,11
Nopresente estudocomparamos osefeitos de sevoflu-ranoepropofolemdanoscausadosaoDNAemummodelode isquemiadeextremidade inferiorinduzidaportorniquete. Paraoobjetivodoestudo,ofatordeestressecirúrgicofoi eliminado,osníveisdeMDAforammedidosparadeterminar aperoxidac¸ãolipídicaeoSCGEfoiusadoparadeterminaro danonoDNA.
Métodos
O Comitê de Ética local forneceu a aprovac¸ão para o estudo.OestudofoiconduzidonoLaboratóriodePesquisa ExperimentaldaUniversidadedeGazidemodosemelhante aomodelodeI/RagudadescritoporHardyetal.12 Usamos
14coelhosdarac¸aNovaZelândia,desetemesese3,5kgem média.OspadrõesdescritosnoGuidefortheCareandUse ofLaboratoryAnimalsforamaplicadosduranteoestudo.13
Figura 1 Infusão de propofol, cateterismo intravenoso e intra-arterial.
BSM-5135K,Japão)eíndicebispectral(BIS)(BispectralIndex Monitor Model 2000, Aspect Medical Systems, Inc., New-ton,MA,EUA)foramregistradosemintervalosde15minutos (min) durante o procedimento. Após a depilac¸ão, sondas pediátricasforamusadasparamonitoraroBIS(Aspect Medi-calSystems,Inc.,Norwood,EUA).Duranteoestudo,oBISfoi mantidoa50±10% e5mL.kg-1.h-1desoluc¸ãosalina
isotô-nicaforaminfundidosduranteoprocedimento.
Os coelhos foram aleatoriamente distribuídos em dois grupos desetecada. NoGrupoS, aanestesia foiinduzida com sevoflurano a 7-8% via inalac¸ão e o Grupo P rece-beuinfusãode1-2mg.kg-1.min-1depropofol(figs.1-2).Um
níveladequadodeinduc¸ãofoideterminadopelo desapare-cimento de movimentosoculares e doreflexo da córnea, além de manter o BIS < 60%. A anestesia foi mantida por meiodainalac¸ão de sevofluranoa 2,5-4% noGrupo S e por meio da infusão de propofol (1-2mg.kg-1.min-1) no
GrupoP.Umamisturadegásfoiadministrada viamáscara facialcomaumataxadefluxode4L.min-1(Dameca,
Dina-marca). A respirac¸ão espontânea foi mantida paraatingir uma saturac¸ão de O2 de ≥ 95%. Ambos os grupos foram
completamente contidos por bandagem elástica a partir daextremidade direitae umtorniquetefoi colocadocom
Figura2 Aplicac¸ãodamáscaradamisturadegásesondado
BIS.
aplicac¸ão de 200mmHg de pressão (manguito pediátrico n◦2,DeRoyal,Powell,TN,EUA).Otorniquetefoiaplicado por120minutos.
Amostrasdesangueforamcoletadascomoamostrasde referência,1minantesdadesinsuflac¸ãodotorniquete(ADT) e15e120mindepoisdadesinsuflac¸ãodotorniquete(DDT-15 eDDT-120,respectivamente).
Determinac¸ãodomalondialdeído
Um dos métodos mais usados para indicar a presenc¸a de radicaislivresdeoxigênioé adeterminac¸ãodoMDAcomo umíndice deperoxidac¸ãolipídica.Duranteo estudo, des-cobrimosque areduc¸ãodos níveisde MDAavaliadasobre asreac¸õesdoácidotiobarbitúrico(TBA)eraumaindicac¸ão indiretadareduc¸ãodosradicaislivresdeoxigênio.Onível plasmáticodeMDAfoimedidocomométodocolorimétrico combasenareac¸ãodoTBAcomoMDA.14
MétodoSCGE(testedocometa)
OtestedocometaseguiuosprotocolosdescritosporSingh etal.15eTiceetal.16comalgumasmodificac¸ões.Ométodo SCGEexaminaodanonoDNAeseusmecanismosdereparo em diferentescondic¸ões experimentais. Oslinfócitos nor-maistêmumnúcleoarredondadodeaspectoclaroemseu interioremenosdensonaslaterais.Adquirebordasde apa-rência irregular juntamente com o inícioda migrac¸ão de fragmentosdeDNAparaforadonúcleo.Oslinfócitos assu-memaformadeumcometaàmedidaqueodanoaumenta; logo,onome‘‘testedocometa’’.Adependerdagravidade dodano, o aspectomicroscópico dacélula estende-se do centroparaaperiferia.Aintensidadedacauda,quantoà flu-orescência,aocomprimentoeaomomento,foiavaliadacom ousodeumsistemainformatizadodeanálisedeimagem.
Análiseestatística
AanálisedosdadosfoifeitacomoprogramaSPSS( Statis-ticalPackagefortheSocialSciences)paraWindows,versão 15.0.Asalterac¸õesrelacionadasaotempointragruposede acordocomosvaloresdecontrole foramcomparadascom otestetpareadoe otestedeWilcoxoneascomparac¸ões entreosgruposforamfeitascomostestestdeStudenteU deMann-Whitney.Osdadosforamexpressosemmédia±DP eumvalordep<0,05foiconsideradosignificativo.
Resultados
MDA
38 S.Onculetal.
Tabela1 NíveisdeMDA(M)[média±DP(min-max)]
Tempo(min) GrupoS
(n=7)
GrupoP
(n=7)
p-valor
Basal 5,10±1,94
(1,53---7,24)
6,26±3,19
(3,32-13,05)
0,425
ADT 5,40±1,36
(3,43---7,12)
8,32±3,86
(4,55-14,28)
0,083
DDT-15 4,98±0,77b
(4,22-6,12)
8,15±2,61a
(5,45-13,39)
0,01
DDT-120 6,40±3,00 (2,76-12,16)
7,09±2,91 (3,88-11,37)
0,0672
ADT, antes da desinsuflac¸ão do torniquete; DDT, depois da desinsuflac¸ãodotorniquete.
ap=0,026,comparac¸ãocomafasebasal. b p=0,01,comparac¸ãocomoGrupoP.
0 2 4 6 8 10 12 14 ADT DDT-120 Basal DDT-15
Grupo S Grupo P
∗
Níveis de MDA (
µ
M)
Figura3 NíveisdeMDA(média±DP)(*p=0,026,comparac¸ão
com valores basais; †p=0,01, comparac¸ão com o Grupo P.
ADT: antes da desinsuflac¸ão do torniquete; DDT: depois da desinsuflac¸ãodotorniquete).
Avaliac¸ãodedanosnoDNA
Nãohouvediferenc¸asignificativanosníveisbasais,ADT, DDT-15e DDT-120 entreosgrupos (tabela 2). Osaumentos no momentoda cauda (p=0,031) e na intensidade da cauda (p=0,029)noGrupoSemADTforamestatisticamente signi-ficativosemcomparac¸ãocomosvaloresbasais(tabela2).Os aumentosnomomentodacauda(p=0,006)enaintensidade dacauda(p=0,01)doGrupoPemDDT-15foramsuperiores aosvaloresbasais(tabela2).Nãohouvediferenc¸a significa-tivaentreosgruposSePemtodosostemposmensurados.
Discussão
Nossosachadosindicamquenãohásuperioridadede sevo-flurano ou de propofol quanto à prevenc¸ão do estresse oxidativo e da genotoxicidade que resultam de lesõesde
I/Rinduzidasportorniquete.
Um torniquete proximal é frequentemente usado em cirurgiademembros parafornecer umsítiocirúrgicosem sangramento.Ogarroteamentoprovocaalterac¸ões metabó-licasquedependemdotempodeinsuflac¸ãodotorniquetee datécnicaanestésica.17Umintervalodetempoentre1-3h deinsuflac¸ãoéconsideradoseguro.Portanto,optamospor
umperíodode2hdeaplicac¸ãodotorniquetenopresente estudo.
Aisquemia/reperfusão resultana produc¸ãodeespécies (tóxicas)reativasdeoxigênio(ERO)nosórgãos.Aisquemia reduzaatividadedasenzimasdedefesacelularcontraas EROeareperfusãoeaintroduc¸ãodeoxigênioperturbaainda maisodelicadoequilíbriodosoxidantes/antioxidantes.18 A mensurac¸ãodosníveis deMDAé omarcadormaissensível paradeterminarograudeperoxidac¸ãolipídica.19,20A sensi-bilidade atingeseu nívelmaisaltoentreo quintoe o20◦ minutos após a desinsuflac¸ão do torniquete.2 Em nosso estudo,o aumentoobservadonosníveis deMDAfoimaior nogrupopropofol15minapósadesinsuflac¸ãodotorniquete doquenogruposevoflurano.Observamosqueasupressãoda peroxidac¸ãolipídicafoimelhornogruposevofluranodurante operíodoinicialdereperfusãoemcomparac¸ãocomogrupo propofol.
Budicetal.demonstraramqueaanestesiavenosatotal compropofoletécnicasdeanestesiaregionalproporcionou umamelhordefesaantioxidanteereduziuadisfunc¸ão endo-telialemcomparac¸ãocomaanestesiageralinalatóriacom sevofluranoduranteaaplicac¸ão dotorniqueteem cirurgia pediátricadeextremidades.19,20Arnaoutoglouetal. relata-ram quepropofolpodeterpropriedadesantioxidantesem cirurgias ortopédicas que requerem a aplicac¸ão de torni-quete,masousodesevofluranorequerestudosadicionais.21 Algunsautoresdemonstraramqueasconcentrac¸ões plasmá-ticas de propofol conseguem inibira peroxidac¸ão lipídica na variac¸ãoem que éclinicamente usadoem anestesia.22 Braz etal.,entretanto,usaram dosesclínicasdepropofol (concentrac¸ão plasmática: 2-4g.mL-1) em cirurgias ele-tivas sem I/R e mostraram que propofol não diminui a
peroxidac¸ãolipídica.7Esseseváriosoutrosautores acredi-tamqueapenasasconcentrac¸õesmaiselevadasdepropofol podemmostraratividadedeeliminac¸ãoderadicaislivres.7,23 SemelhantementeaoestudorealizadoporBrazetal., des-cobrimosquepropofolnãodiminuiuaperoxidac¸ãolipídica; porém,aocontráriodeoutrosestudos,nãofizemoscirurgia, esimisquemiapor120min.Emboraosníveisplasmáticosde propofolnãotenhamsidomedidosemnossoestudo, aumen-tosnos níveisdeMDAforamobservadosno15◦ minuto de reperfusãonogrupopropofol.
Aformac¸ão deradicaisdeoxigênioinduzidapor isque-mia/reperfusão causa rupturas nos filamentos de DNA e desempenhaumpapelimportantenapatogêneseda reper-fusão. A eletroforese em gel de célula única (teste do cometa)éummétodosimples,sensívelerápidopara esti-mardanosnoDNA.10 Muitosestudosmostraramqueodano induzidopelaI/RaoDNApodeserinvestigadoem
leucóci-tosperiféricosdehumanoscomouso dotestedocometa alcalinomodificado.3,24Apósaisquemia,danosgenotóxicos foramdetectadosemleucócitosperiféricosdehumanos,o queessencialmentelevaàlibertac¸ãodequantidades subs-tanciaisderadicaisdeoxigênioeoutrosagentesreativos.10 Emnossoestudo,usamosessemétodoparaanalisarodano causadoporagentesanestésicosaoDNA.
HápoucosestudossobreodanooxidativoaoDNAdevidoà
I/Rinduzidaportorniquete.Essesestudosavaliaramos
e
danos
ao
DNA
durante
anestesia
39
Tabela2 Momentodacauda,comprimentodacaudaeintensidadedacauda,em50células[média±DP(min-max)]
Tempo(min) GrupoS(n=7) GrupoP(n=7) p-valor
Momentoda
cauda
Comprimento
dacauda
Intensidade
dacauda
Momentoda
cauda
Comprimento
dacauda
Intensidade
dacauda
Momentoda
cauda
Comprimento
dacauda
Intensidade
dacauda
Basal 0,75±0,27
(0,36-1,17)
25,19±1,88
(22,93-28,81)
4,55±1,37
(2,43-6,76)
0,63±0,27
(0,29-1,17)
25,25±3,55
(22,10-32,87)
3,76±1,26
(1,73-6,07)
0,422 0,971 0,285
ADT 1,12±0,38a
(0,77-1,86)
30,34±9,79 (24,98-52,23)
6,14±1,48a
(4,41-8,62)
1,80±1,72 (0,58-5,32)
35,10±18,05 (23,66-71,39)
7,53±4,23 (3,53-14,43)
0,328 0,551 0,427
DDT-15 1,51±1,70 (0,51-5,34)
34,46±24,90 (23,61-90,89)
7,47±5,96 (3,52-20,76)
1,05±0,45a
(0,50-1,90)
27,69±7,73 (21,77-44,36)
5,33±1,56a
(3,33-8,42)
0,506 0,505 0,377
DDT-120 1,12±0,68 (0,65-2,63)
29,13±9,51 (21,99-49,89)
6,15±3,35 (3,83-13,53)
1,06±0,56 (0,51-1,89)
26,22±5,28 (21,11-36,68)
5,45±2,09 (3,38-8,85)
0,881 0,492 0,646
ADT,antesdadesinsuflac¸ãodotorniquete;DDT,depoisdadesinsuflac¸ãodotorniquete. Nãohouvediferenc¸asignificativaentreosgrupos.
40 S.Onculetal.
torniqueteeque,depois,diminuíramdurante2h,masnão retornaramaosvaloresbasaispré-isquemia;issosugereque aI/Rinduzefeitosgenotóxicosemleucócitosdehumanos,
provavelmenteemrespostaaoestresseoxidativodurantea reperfusão.3
Alguns estudos demonstraram que materiais genéticos podemserdanificadoscomousodeanestésicos halogena-dos,avaliados com ametodologia deeletroforese em gel decélula única.5,6,25 Karabiyiket al.usaram essemétodo para avaliar danos no DNA de pacientes que receberam anestesia com sevoflurano e isoflurano. Os autores con-cluíram que ambos os agentes causam danos reversíveis no DNA, mas que não existe uma diferenc¸a significativa entre os fármacos a esse respeito.6 Propofol difere dos anestésicosvoláteispornãoapresentarefeitosmutagênicos invitroouinvivo.7,9Brazetal.usaramumaversãoalcalina daeletroforeseemgeldecélulaúnicaerelataramque pro-pofolnãoinduz danosao DNAem leucócitos.7Além disso, propofolnãoinduziupermutadecromatídeosirmãos(SCE) em linfócitos decrianc¸as8 e não aumentou asaberrac¸ões cromossômicasempacientesdecirurgiacardíaca.9
DeacordocomAllevaetal.,édifícilavaliarinvivosea principalcausadodanocelularédevidaaosanestésicosou aoestressecirúrgico.Essesautoresavaliarama genotoxici-dadeempacientessubmetidosàanestesiacomsevoflurano e não encontraram alterac¸ões significativas no DNA após 15min deinduc¸ão daanestesiaantesdacirurgia.5 Em um estudo recente, Braz et al. relataram que os pacientes submetidos a pequenas cirurgias sob anestesia geral com sevoflurano e isoflurano inalatórios ou com propofol não apresentaramquebrasnosfilamentosdeDNAousítios álcali--lábeis em linfócitos periféricos.26 De forma semelhante, eliminamos o fatorde estressecirúrgico em nossoestudo enossosresultadostambémforamcontráriosaosdeoutros estudos. Em nosso estudo, os níveis de intensidade e de momentodacauda(indicadoresdedanosnoDNA) aumenta-ramgradualmenteemambososgruposemcomparac¸ãocom osníveisbasais. Nogruposevoflurano,o danocausado ao DNAaumentouaos120minutosdeisquemia;emcontraste, o dano causado ao DNA foi mais acentuado no início do período de reperfusão e esse aumento foi paralelo ao aumentodosníveisdeMDA.Essesachadospodemindicara incapacidadede propofoldesuprimiro estresseoxidativo de modo eficiente. No grupo sevoflurano, o aumento do dano causado ao DNA antes da reperfusão ratifica a propriedadegenotóxica de sevoflurano.A diferenc¸a entre osgruposdesapareceuaos120minutosdereperfusão.
Conclusões
Este estudo deI/R experimental mostrouque sevoflurano
podecontrolar aperoxidac¸ãolipídica melhor do que pro-pofol. Doses mais elevadas de propofol (em comparac¸ão com a dose clínica) podem ser necessárias para evitar a peroxidac¸ãolipídica. Devidoàfalta dediferenc¸a entreos doisanestésicosemestágiostardiosdereperfusão, acredi-tamosquenãohásuperioridadetantodesevofluranoquanto depropofolparapreveniragenotoxicidaderelacionadaao estresseoxidativoemcirurgiasdeextremidadesque envol-vemousodetorniquete.Sabe-sequetodososanestésicos têm efeitos secundários nocivos; portanto, é importante
escolherdeformaapropriadaumagentequetenhaoefeito colateralmenostóxico.Aesserespeito,podemosdizerque maisestudossobreagenotoxicidaderelacionadaaoestresse oxidativosãonecessários.
Limitac
¸ões
Aavaliac¸ãodosdanoscausadosaoDNAapartirdeamostras do tecido local(músculo etc.) e a mensurac¸ão dos níveis plasmáticosdepropofolpermitiriammaisestudos informa-tivos.Essaspodemserconsideradascomoaslimitac¸õesde nossoestudo.
Financiamento
UniversidadedeGazi---ProjetosdePesquisaemCiência.
Conflitos
de
interesse
Osautoresdeclaramnãohaverconflitosdeinteresse.
Referências
1.GogusN, Akan B,Bayrakci S, et al. The effects ofa small--dose ketamine-propofol combination on tourniquet-induced ischemia---reperfusioninjuryduringarthroscopickneesurgery. JClinAnesth.2014;26:46---51.
2.ChengYJ,ChienCT,ChenCF.Oxidativestressinbilateraltotal kneereplacement, underischaemictourniquet.JBoneJoint SurgBr.2003;85:679---82.
3.WillyC,DahoukS,StarckC,etal.DNAdamageinhuman leu-kocytesafterischemia/reperfusioninjury.FreeRadicBiolMed. 2000;28:1---12.
4.Cordis GA, Maulik G, Bagchi D, et al. Detection of oxi-dative DNA damage to ischemic reperfused rat hearts by 8-hydroxydeoxyguanosine formation. J Mol Cell Cardiol. 1998;30:1939---44.
5.Alleva R, Tomasetti M, Solenghi MD, et al. Lymphocyte DNA damage precedes DNA repair or cell death after orthopaedicsurgery undergeneralanaesthesia. Mutagenesis. 2003;18:423---8.
6.KarabiyikL,Sardas¸S,PolatU,etal.Comparisonof genotoxi-cityofsevofluraneandisofluraneinhumanlymphocytesstudied invivousingthecometassay.MutatRes.2001;492:99---107. 7.BrazMG,MagalhãesMR,SalvadoriDM,etal.EvaluationofDNA
damageandlipoperoxidationofpropofolinpatientsundergoing electivesurgery.EurJAnaesthesiol.2009;26:654---60. 8.Krause TK, Jansen L, Scholz J, et al. Propofol anesthesia
in children does not induce sister chromatid exchanges in lymphocytes.MutatRes.2003;542:59---64.
9.Karahalil B, Ya˘gar S, Bahadir G, et al. Diazepam and pro-pofol used as anesthetics during open-heart surgery do not causechromosomalaberrationsinperipheralblood lymphocy-tes.MutatRes.2005;581:181---6.
10.Collins AR. The comet assay for DNA damage and repair: principles, applications, and limitations. Mol Biotechnol. 2004;26:249---61.
11.TiceRR, AgurellE, AndersonD, etal. Singlecell gel/comet assay:guidelinesforinvitroandinvivogenetictoxicology tes-ting.EnvironMolMutagen.2000;35:206---21.
13.Instituteof LaboratoryAnimalResearch, CommissiononLife Sciences,NationalResearchCouncil.Guideforthecareanduse oflaboratoryanimals.Washington,DC:TheNationalAcademies Press;1996.
14.Templar J, Kon SP, Milligan TP, et al. Increased plasma malondialdehyde levelsin glomerular disease asdetermined bya fully validated HPLC method. Nephrol Dial Transplant. 1999;14:946---51.
15.SinghNP,McCoyMT,TiceRR,etal.Asimpletechniquefor quan-titationoflowlevelsofDNAdamageinindividualcells.ExpCell Res.1988;175:184---91.
16.Tice RR, Andrews PW, Hirai O, et al. The single cell gel (SCG)assay:anelectrophoretictechniqueforthedetectionof DNAdamageinindividualcells.AdvExpMedBiol.1991;283: 157---64.
17.Kam PC, Kavanagh R, Yoong FF. The arterial tourniquet: pathophysiologicalconsequencesandanaestheticimplications. Anaesthesia.2001;56:534---45.
18.McCordJM.Freeradicalsand myocardialischemia:overview andoutlook.FreeRadicBiolMed.1988;4:9---14.
19.Budic I,Pavlovic D,Kocic G, et al. Biomarkers ofoxidative stressandendothelialdysfunctionaftertourniquetreleasein children.PhysiolRes.2011;60Suppl.1:S137---45.
20.Budic I, Pavlovic D, Kitic D, et al. Tourniquet-induced ischemia---reperfusioninjuriesduringextremitysurgeryat chil-dren’sage:impactofanestheticchemicalstructure.RedoxRep. 2013;18:20---6.
21.Arnaoutoglou H, Vretzakis G, Souliotis D, et al. The effects of propofol or sevoflurane on free radical production after tourniquet induced ischemia---reperfusion injury during knee arthroplasty.ActaAnaesthesiolBelg.2007;58:3---6.
22.Aarts L, van der Hee R, Dekker I, et al. The widely used anestheticagentpropofolcanreplacealpha-tocopherolasan antioxidant.FEBSLett.1995;357:83---5.
23.GreenTR,BennettSR,NelsonVM.Specificityandpropertiesof propofolasanantioxidantfreeradicalscavenger.ToxicolAppl Pharmacol.1994;129:163---9.
24.KarahalilB,PolatS,SenkoyluA,etal.EvaluationofDNAdamage aftertourniquet-induced ischaemia/reperfusion injuryduring lowerextremitysurgery.Injury.2010;41:758---62.
25.Sardas¸S,KarabiyikL,AygünN,etal.DNAdamageevaluatedby thealkalinecometassayinlymphocytesofhumans anaestheti-zedwithisoflurane.MutatRes.1998;418:1---6.
![Tabela 1 Níveis de MDA (M) [média ± DP (min-max)]](https://thumb-eu.123doks.com/thumbv2/123dok_br/14960224.506542/4.918.90.447.114.296/tabela-níveis-de-mda-média-dp-min-max.webp)
![Tabela 2 Momento da cauda, comprimento da cauda e intensidade da cauda, em 50 células [média ± DP (min-max)]](https://thumb-eu.123doks.com/thumbv2/123dok_br/14960224.506542/5.1216.81.1159.328.542/tabela-momento-cauda-comprimento-cauda-intensidade-células-média.webp)
